1 前言

維生素C是嬰幼兒配方奶粉質量評價的關鍵指標。現行國標GB 5009.86-2025中的手工滴定法，在奶粉等有色或渾濁基質中終點判定困難，易引入人為誤差；熒光法雖準確但操作繁瑣，不適于批量快檢。

本方案在國標基礎上改進為永停滴定法——以2,6-二氯靛酚為滴定劑，通過雙鉑電極監測電流突躍自動判定終點，不受樣品顏色和濁度影響；同時避免了碘滴定法氧化性過強導致結果偏高的問題。該方法操作簡便、重復性好，適用于嬰幼兒配方乳粉及調制乳粉中抗壞血酸的日常批量檢測。

2 儀器與試劑

2.1 儀器

電位滴定儀（帶永停滴定功能），雙鉑電極，分析天平，具塞錐形瓶、容量瓶等玻璃器皿。

圖 1 電位滴定儀外觀圖

2.2 試劑

草酸溶液（20 g/L）：稱取草酸20 g，用水溶解并定容至1 L。

2,6-二氯靛酚溶液：稱取碳酸氫鈉52 mg溶解于200 mL熱蒸餾水中，再加入2,6-二氯靛酚50 mg溶解，冷卻后用水定容至250 mL，過濾至棕色瓶，于4℃避光保存。

L-抗壞血酸標準品（純度≥99%）。

L-抗壞血酸標準溶液（1.0 mg/mL）：稱取L-抗壞血酸標準品100 mg（精確至0.1 mg），溶于草酸溶液并定容至100 mL，臨用現配。

3 實驗方法

3.1 試樣制備

取代表性奶粉樣品約100 g，置于粉碎機中，加入草酸溶液100 g，迅速搗成勻漿。準確稱取制備好的勻漿樣品10 g~40 g（精確至0.01 g）于錐形瓶中（本方案稱取約20 g，相當于試樣質量約10 g），用草酸溶液轉移至100 mL容量瓶中，定容至刻度，搖勻后過濾。棄去初濾液，收集后續濾液備用。

圖 2 樣品實物圖

3.2 2,6-二氯靛酚溶液的標定

準確吸取0.5 mL、1.0 mL、1.5 mL、2.0 mL抗壞血酸標準溶液（1.0 mg/mL），分別置于50 mL錐形瓶中，各加入草酸溶液50 mL，用永停滴定儀以2,6-二氯靛酚溶液滴定，儀器自動記錄滴定終點體積。

以抗壞血酸含量（mg）為縱坐標（y），滴定劑體積（mL）為橫坐標（x），繪制標準曲線，回歸方程：y = 0.0794x - 0.0258。

3.3 樣品測定

準確吸取試樣濾液10 mL于滴定杯中，加入草酸溶液50 mL，置于永停滴定儀上，插入雙鉑電極，啟動攪拌。用標定過的2,6-二氯靛酚溶液滴定，儀器自動監測電流變化并判定終點，記錄消耗體積V。

圖

3 滴定過程圖

3 滴定過程圖

3 滴定過程圖

圖 3 滴定過程圖

3.4 永停滴定參數設置

4 結果與討論

4.1 計算公式

將樣品滴定消耗體積V代入標準曲線回歸方程，查得對應的抗壞血酸質量m_AA（mg），按下式計算樣品含量：

式中：

X — 試樣中還原型抗壞血酸的含量，mg/100g；

mAA — 由標準曲線查得的10 mL濾液中抗壞血酸的質量，mg；

A — 稀釋倍數（100 mL / 10 mL = 10）；

m — 試樣質量，g；

100 — 換算為每百克的系數。

備注：

空白試驗中永停滴定無電流突躍，無法獲得有效空白體積，故不進行空白校正，標準曲線法已扣除試劑本底影響。

若滴定劑濃度穩定，可采用兩點法（0.5 mg和2.0 mg）簡化標定，但建議定期（每周或更換試劑時）多點標定以確保準確性。

4.2 測試結果

圖 4 樣品滴定曲線圖

4.3 精密度

在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的10%，符合GB 5009.86-2025要求。

4.4 方法比對

采用GB 5009.86-2025中第三法手工滴定法對同批次樣品進行比對測定：

比對結果表明，永停滴定法結果較手工法偏高約2%。兩種方法終點判定原理不同，手工法依賴顏色變化（粉紅色出現），其變色范圍與化學計量點存在差異；永停法則直接反映化學反應計量點，偏差屬正常現象，在可接受范圍內。

5 方案特點與優勢

5.1 方法優勢

終點判定客觀：永停滴定通過電流突躍自動識別終點，消除目視判斷的主觀差異，有效解決奶粉等有色或渾濁樣品終點辨識困難的問題。

選擇性優良：選用2,6-二氯靛酚為滴定劑，氧化能力適中，能夠選擇性氧化還原型抗壞血酸，避免碘滴定法因氧化過強導致結果偏高。

自動化程度高：儀器全程控制滴定、終點識別及體積記錄，減少人為操作誤差，提升數據可溯源性。

重復性好：三次平行測定結果離散度小（調制乳粉RSD=0.46%，嬰兒配方奶粉RSD=0.33%），滿足國標精密度要求。

無需空白校正：采用標準曲線法定量，規避永停滴定在空白體系中無電流突躍的問題，流程更順暢。

5.2 適用場景

適用于嬰幼兒配方乳粉、調制乳粉及其他乳制品中抗壞血酸的含量監控。通過調整稱樣量可覆蓋不同濃度水平樣品。前處理僅需酸性提取后直接滴定，無需復雜凈化步驟，適于日常質控實驗室的連續分析。

5.3 操作要點

全程避光操作，防止抗壞血酸光解；

標準溶液及滴定劑臨用現配，避免分解；

奶粉樣品充分混勻后稱量，保證取樣代表性；

雙鉑電極使用后及時清洗，維護響應靈敏度。

6 結論

本方案將GB 5009.86-2025中的手工2,6-二氯靛酚滴定改進為永停滴定法。實驗表明，以2,6-二氯靛酚為滴定劑，通過雙鉑電極監測電流突躍自動判定終點，操作簡便、結果準確可靠，有效彌補了電位滴定終點躍遷不明顯及碘滴定選擇性差、結果偏高的不足。該方法適用于調制乳粉、嬰幼兒配方奶粉等乳制品的批量檢測，可為產品質量控制提供可靠的技術支持。

7 參考文獻

[1] GB 5009.86-2025 食品安全國家標準 食品中抗壞血酸的測定[S].

本文檔為通用技術方案，具體儀器操作請參考對應設備說明書。